为了满足越来越复杂样品的高l效、快速分离和分析的需求,硅胶色谱填料的制备技术在不断进步和。从早形貌不规则的无定形硅胶发展到球型硅胶;从粒径分布宽的多分散球型硅胶发展到粒径高度均一的单分散球型硅胶;从全多孔球型硅胶发展到表面多孔核壳结构硅胶;从金属杂质含量高的A型硅胶发展到超纯的B型硅胶;从不耐碱的纯硅胶基质发展到耐碱的有机杂化硅胶;从相对单一的键合相到更加多样化的键合相硅胶色谱填料。每一次硅胶材料制备技术的进步都促进了硅胶色谱分离分析性能的进一步提升,并拓展其应用范围。
反相色谱是比较常用的色谱分离模式,占到了全部分析色谱的70%左右。通常只需优化流动相组成就可实现对大多数有机化合物和多肽的分离分析。反相硅胶色谱填料的制备方法比较简单,主要是通过硅胶表面羟基与带不同烷l基链或***键合。其中***、C8和C18 硅胶键合相是使用比较广泛的反相色谱填料。反相色谱填料的研究是朝着柱效高、重现性好、分析速度快、制备方法简单、硅羟基掩蔽完全、选择性好、pH使用范围宽、寿命长等目标进行。反相硅胶色谱填料发展主要是两方面:一方面是制备越来越丰富的键合相以满足HPLC 越来越广的分离选择性的要求;另外一方面是解决反相色谱填料表面残留硅羟基带来拖尾、pH适用范围受限、及使用寿命短等问题。反相色谱填料制备的过程中, 由于位阻原因,硅胶表面的硅羟基不可能全部与***反应,残留的硅羟基在反相分离过程中会与极性分子形成非特异性吸附,导致l极性化合物尤其是碱性化合物色谱峰变宽,甚至严重拖尾,柱效下降等。另外残留硅羟基还会影响硅胶色谱填料的耐酸碱性,并限制其pH使用范围,缩短填料使用寿命。因此开发有效封尾(封端)技术以减少或消除残留硅羟基从而改善反相色谱填料性能是色谱填料研究的重要方向之一。另外在封端过程中引进带正电荷的功能基团也可以屏蔽硅羟基对碱性化合物非特异吸附。
SEC色谱填料SEC色谱分离模式与其它所有分离模式很大的不同就是样品分子与固定相表面配基之间不存在相互作用。SEC 对样品组分分离只取决于填料的孔径大小与被分离组分分子尺寸之间的关系,与流动相的性质没有直接的关系。不同大小的溶质分子可以通过扩散迁移和渗透到不同大小的孔洞里。小分子,可以进入更多更深的孔道里,因此小分子驻保留时间长,洗脱体积大,而大分子会被小孔排阻在外,只能进入大孔孔洞中,因此其经过柱床的路径比较短,会先从柱子中洗脱出来,从而实现具有不同分子大小样品的分离。
纳微科技凭借其单分散硅胶基球精准制造技术的优势,开发了新型有机杂化技术,使得纳微杂化硅胶pH使用范围从pH 3-8 拓宽到pH 2-12。纳微开发出UniChiral系列手***谱填料,其分离性能达到进口同类材料的水平,而且凭借其单分散的优势,其手***谱填料具有更高柱效,更低的柱压,和更长的寿命;其次纳微科技与纳谱分析合作开发出全系列NanoChrom体积排阻(SEC)的填料和色谱柱,由于纳微SEC硅胶基球具有高度粒径均一性,其耐压性和寿命比进口同类产品具有明显的优势。同时,纳微还成功地开发了耐碱性好的胰岛素分离纯化C8色谱填料,使得纳微色谱填料在胰岛素的分离纯化上完全可以与同类产品相媲美。纳微科技不仅是世界首l个开创了单分散硅胶色谱填料规模化制备技术,还开发了单分散聚合物色谱填料的规模化制备技术,极大拓展了世界单分散聚合物色谱填料粒径、孔径、及应用的选择范围,并通过表面改性及功能化实现离子交换、疏水及亲和色谱填料的产业化,可以满足从小分子到大分子分离纯化的各种需求。纳微已经成为世界上极l少数可同时大规模生产单分散硅胶和单分散聚合物色谱填料的公司。
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