小粒径无孔单分散层析介质用于病毒的分离纯化

传统的层析介质填料都是多孔的微球，因为多孔微球材料的比表面积大，因而可以对一般生物分子分离提供较高的吸附载量。层析介质的孔径一般都小于2000?（通常都小于100纳米）。而很多病毒颗粒的粒径一般都大于20纳米，有的甚至都超过100纳米。由于体积排阻的原因，病毒颗粒无法扩散进入层析介质的孔内，因而在层析吸附病毒颗粒时只有介质微球的外表面可以利用，孔内表面积由于体积排阻的原因而无法吸附病毒颗粒。然而，病毒样品中的杂质分子一般都比病毒小，因而可以扩散进入层析介质孔内被吸附在里面。由于传统层析介质孔内表面积远远大于介质微球外表面积，杂质吸附往往由于孔内表面积的存在而非常显著，吸附洗脱时杂质含量因而较高，病毒颗粒纯化效果往往不理想。无孔层析介质由于没有大量只能容纳杂质进入而病毒颗粒无法扩散进入的内孔，病毒颗粒在介质外表面的层析吸附量虽然不会有明显变化，但样品中的杂质被层析吸附的量会显著减少。因此经无孔层析填料层析洗脱后，病毒样品的分离纯度显著提高。

整体柱制备方法是把单体和致孔剂混合液填充到柱子中，经过升温产生聚合反应，在反应过程利用相分离原理形成贯穿孔结构整体柱，由于整个柱子是一个整体，可以保持较高的孔隙率和较高的机械强度。由于整体柱的孔隙率大, 可以减小流动相阻力和路径扩散, 提高可及比表面积及病毒吸附载量，从而提高病毒的分离效率。整体柱层析已被证明是病毒及病毒类大分子比较理想的分离方法。但目前整体柱制备方法有很大的局限性，因为在整体柱合成过程中，其孔径大小是通过反应过程中相分离来决定的，而相分离容易受到温度，反应速度等影响，因此孔径大小不容易控制，导致柱间批次的稳定性和重复性差，而且不容易制备能满足生产需求的大尺寸整体柱。这些因素是整体柱不能广泛用于病毒的分离纯化的主要原因。

   之三：高度交联聚丙l烯酸酯基球替代软胶或低交联的聚丙l烯酸酯基球    高机械强度介质不仅可以耐受更高流速、更高压力、更大粘度样品，还可以装更高的柱床，以增加抗l体批处理量、提高抗l体生产效率、减少设备***、减少厂房占用面积。因此纳微Protein A 介质是选择高度交联的聚丙l烯酸酯基球，与市场上以琼脂糖或低交联度聚丙l烯l酸酯为基球生产的Protein A 介质相比具有溶胀系数小、压缩比例低、而且机械性能强。实验证明 UniMab在2公斤装柱压力下，其柱床压缩比例只有5%，而无论是GE 生产的以琼脂糖为基球还是Tosoh 生产的低交联聚合物为基球的Protein A 介质压缩比例往往超过15%。

“花十几年攻克底层技术，很多人都不愿意干，但如果一直没人做，那么中国的生物医l药产业链就不可能实现闭环。”

纳微董事长江必旺博士说，生物制药的生产过程中，下游分离纯化占据了50%-70%左右的成本，如果能有高l性能的纯化介质，那么整个生物制药的成本便会降低，老百姓的用药成本自然也会下降。“当时我面前出现了两种选择，一是借鉴我在美国的工作经验，模仿现有技术，直接产业化；二是完全自主研发，做型产品。”

作为一名“技术宅”，江必旺选择了后者。他说，中国企业只有做出自己的底层技术，才真正能够得到尊重，也能改变外国企业对中国产品只会模仿、不会超越的固有观念。

不过，研发之路并不止步于此。“2019年公司产值做到1.4亿元，产品涵盖生物医l药、食品安全、核酸检测、水环境治理、核工业技术等领域，其中30%的销售产值，我们都用在了科研攻关上。”