第二代球形硅胶色谱填料的粒径分布较宽，而粒径分布是影响色谱填料性能的重要参数之一。在高l效液相色谱分离过程中，流动相流过的通路主要是粒状填料间的间隙，而填料形状、粒径大小及分布、都会影响填充柱床紧密程度的均一性，导致溶质分子在填充柱床中的流动路径和保留时间发生变化，从而影响分离效果。因此粒径分布均匀，形貌规整的球形填料填充柱床的紧密程度一致性好，流动相在柱床中的流速均匀，流动相经过柱床的路径长短一致，从而有效降低涡流扩散系数，使色谱峰宽变窄，理论塔板数升高。

手***谱填料硅胶色谱填料中特殊而又引人注目的是手***谱填料。手***谱可以用于分离光学对映异构体分子。手性分离是色谱分离领域很具有挑战的，因为色谱分离往往是依据不同分子物理和化学性质差异如分子大小、表面电荷、极性等的不同建立不同色谱分离模式。一般来说物理和化学性能越相似的组分，其色谱分离难度越大，而光学对映异构体分子其化学和物理性质基本相同，只是结构上不可重叠且呈镜像对称。描述光学对映异构体很简单而又生动的模型是人的左右手，因此手性分离很具有挑战性。

SEC色谱填料SEC色谱分离模式与其它所有分离模式很大的不同就是样品分子与固定相表面配基之间不存在相互作用。SEC 对样品组分分离只取决于填料的孔径大小与被分离组分分子尺寸之间的关系，与流动相的性质没有直接的关系。不同大小的溶质分子可以通过扩散迁移和渗透到不同大小的孔洞里。小分子，可以进入更多更深的孔道里，因此小分子驻保留时间长，洗脱体积大，而大分子会被小孔排阻在外，只能进入大孔孔洞中，因此其经过柱床的路径比较短，会先从柱子中洗脱出来，从而实现具有不同分子大小样品的分离。