细胞生物学常用解决方案「英瀚斯」
作者:英瀚斯2021/11/10 10:01:32






细胞实验部分设备图片





公司目前拥有多项产品及技术,其中发明两项,软件著作权八项,实用新型三项,商标两件。公司先后获得“江苏省民营科技企业”、“江苏省科技型中小企业”、“江苏省专精特新中小企业”等荣誉资质,连续多年被评为“东南大学***大学科技园企业”。一般流程:细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照细胞迁移和侵袭实验是体外模拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。2019年公司成为江苏省生物技术协会第七届理事会的特邀理事,成立了“李冬冬创新工作室”,并获得了南京市“工人先锋号”的荣誉称号。


yao物对细胞的IC50检测  

     IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半***浓度。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在***某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。实验流程:慢病毒质粒构建-HEK293T细胞培养-质粒转染293T细胞-病毒收集-病毒纯化-病毒滴度检测-细胞-稳转细胞筛选-稳转细胞鉴定结果示例:图A病毒滴度检测。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药wu诱导肿liu细胞凋亡50%,该浓度称为50%***浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量yao物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对yao物的耐受程度。





磁性细胞标记方式

应用MACS技术进行磁性细胞分选重要的一点是高质量的标记。要尽可能地增强阳性细胞的标记,并减弱背景染色。有两种基本的磁性标记方式:直接标记和间接标记。

1、直接磁性细胞标记(Direct magnetic cell labeling)

(磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞)直接标记是快速、***特异的磁性标记方法。目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的MACS直标微珠可供选用。

2、间接磁性细胞标记(Indirect magnetic cell labeling )

(磁珠结合不需要的细胞,游离于磁场的细胞为所需细胞)间接磁性细胞标记需要联合使用单ke隆或者多ke隆抗ti和MACS间标微珠。未结合抗ti、生物素化抗ti或者荧光素标记抗ti均可作为一抗标记细胞,再使用抗免yi球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗,均可用于间接标记。细胞ELISPOT检测1.培养板的预处理:在24孔培养板内加0。间接标记主要在如下情况时选用:当没有直标磁珠时;需要用几种抗ti的混合物同时分选或去除多种类型的细胞;间接标记有放大作用,因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用;使用自备或者配体的磁珠分选中。( -般而言,阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大,阳性分离法用行更多。)






细胞分化

细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是在空间上细胞产生差异,在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。细胞分化的本质是***组在时间和空间上的选择性表达,通过不同***表达的开启或关闭,终产生标志性蛋白质。25%胰蛋白酶消化并轻轻吹打,使之成为单细胞,作活l细胞计数,用含20%胎牛血l清的DMEM培养液调整细胞密度至1x106细胞/L。细胞诱导是指将一群不同类型或者形态结构、功能特征存在差异的细胞通过生物学、物理学等手段,将之转变为具有相似/相同形态结构、功能特征的细胞群体的过程。






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