随着蛋白质组学的迅猛发展,重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等,可用于辅助目标蛋白的纯化,这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段(序列为:EQKLISEEDL)。Myc标签可放在C端或N端,但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此 Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。Myc标签已成功应用于WB杂交技术、***沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在***、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。
如何选择合适的Myc标签***?
我们在选择一个标签***时,主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括,Myc***的应用检测类型、Myc***的***性及制备来源等。比如 该Myc***是否能用于***荧光IF的检测?是否可以用于Western Bloting和***沉淀IP实验?是否需要特异性更好的单***Myc标签***?
一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单******一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多******。另外,***的效价也是考察该***性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl Myc***(假如其WB检测的稀释比率是1:5000,***终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的Myc***(假如WB检测的稀释比率是 1:200,***终使用液相当于2ml)性价比更高。因此在选择***的时候,不但需要考虑***的量,还需要考虑***的效价,即不同应用的建议稀释比率。
为什么选择EarthOx的Myc单******(货号E022050)
目前市面上能提供的Myc***有国产分装或原产的;也有原装进口,诸如Abcam、CST、Sigma、Novus、Millipore等。国产分装的Myc***在质量稳定性上有不足,并且经过分装以后,其效价也有损失。而原产于国内实验室的Myc***有些具有较好的检测活性,但是在应用类型上有差距,并且在批次之间的稳定性上较难控制,而国内仅有的少量原产***也是多******。
因此,我们向您推荐美国EarthOx的Myc标签*** Anti-Myc Tag Monoclonal Antibody [Myc.A7](货号为E022050)。该Myc***为单******,***号为Myc.A7。其抗原为KLP偶联的c-Myc 410-419位肽段(序列为:EQKLISEEDL),即Myc标签蛋白作为***原。该Myc单******的效价非常高,WB实验推荐稀释比率为 1:1000-1:10000,甚至有客户报告更高的稀释比率。在***荧光IF、***沉淀IP实验里的表现也很优异。
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