开机:
开机前确认电源是否连接、所连电脑是否开机;
打开仪器电源开关;
双击电脑桌面上UVPC图标或在开始菜单中找到UVPC图标并打开,等待仪器自检。
使用:
仪器自检结束后,在菜单“Acquire Mode”(测定模式)下选中所需的测定方式:“Spectrum”(光谱扫描)、“Quantitative”(定量计算)及“Time Course”(时间曲线扫描)。
1.Spectrum(光谱扫描):
1.1 调节参数:
在菜单“Configure”中选中“Parameters”或用“Ctrl + P”调用参数表,选择所需参数。通常改动波长范围(W***elength Range),修改扫描范围。点击“OK”,等待仪器调整至准备状态。
1.2 调整基线:
在样品槽及参比槽中放入调整基线溶液的比色皿,盖好上盖,点击“Baseline”,待仪器自动调整基线。
1.3 扫描谱图:
将样品槽中的比色皿中溶液换成被测溶液,盖好上盖,点击“Start”,待仪器自动测试完毕。完毕时会自动出现“S***e”状态,点击“S***e”。再在菜单“File”中选中“S***e”或用“Ctrl + S”,将该光谱图存入所需位置及名称。
2.Quantitative(定量计算):
2.1 调节参数:
在菜单“Configure”中选中“Parameters”或用“Ctrl + P”调用参数表,选择所需参数。通常修改测定波长值(W***elength)。如需绘制标准曲线,可再选中“Concentration”项,修改其中的浓度单位,如:g/dl、mg/ml等;在测定范围中输入测定范围值,如0到100。如果样品做重复点,可在“Repetiti***”项中选中重复数(但可选重复数不大于5)。点击“OK”,等待仪器调整至准备状态。
2.2 绘制标准曲线:
选中“Standard”项,至标准品测定状态。在样品槽及参比槽中放入调整基线溶液的比色皿,盖好上盖,点击“Auto Zero”。再将样品槽中的比色皿中溶液换成被测溶液,盖好上盖,点击“Read”,会自动出现“Edit Standard”状态,在浓度项“Concentration”中输入该溶液的浓度值。点击“OK”,仪器会自动记录并等待下一个标准品的测定。更换样品池中的标准品并遂一测定至全部标准品测定完毕。在菜单“File”中选中“S***e”或用“Ctrl + S”,将该标准曲线存入所需位置及名称。
如用以前绘制的标准曲线,可在菜单“File”中选中“Open”或用“Ctrl + O”,将所要调用的标准曲线打开。注意文件类型“List Files of Type”;如需查看该标准曲线的参数,在“View Parameters”项前方框中打钩,就可以看到该标准曲线的参数。
2.3 测定样品:
选中“Unknown”项,将样品槽中的比色皿中溶液换成被测溶液,盖好上盖,点击“Read”,仪器会自动记录测定吸收值,同时根据标准曲线计算出对应的浓度值;仪器会自动等待下一个样品的测定。遂一更换样品池中的样品并测定至全部样品测定完毕。在菜单“File”中选中“S***e”或用“Ctrl + S”,将该样品结果存入所需位置及名称。
3.Time Course(时间曲线扫描)
3.1 调节参数:
在菜单“Configure”中选中“Parameters”或用“Ctrl + P”调用参数表,选择所需参数。通常改动测定波长值(W***elength):修改测定波长;反应时间(Reaction Time):修改反应时间;单位(Units):可选小时、分钟或秒(默认的是秒)。点击“OK”,等待仪器调整至准备状态。
3.2 调整零点:
在样品槽及参比槽中放入调整基线溶液的比色皿,盖好上盖,点击“Auto Zero”。
3.3 扫描谱图:
将样品槽中的比色皿中溶液换成被测溶液,盖好上盖,点击“Start”,待仪器自动测试完毕。完毕时会自动出现“S***e”状态,点击“S***e”。再在菜单“File”中选中“S***e”或用“Ctrl + S”,将该光谱图存入所需位置及名称。
关机:
1.将比色皿中的溶液到尽,然后用蒸馏水或***冲洗比色皿至干净,将比色皿保存在保存液中;将仪器外盖盖好。
2.退出UVPC操作系统,关闭UVPC仪器。
注意事项:
1.测定紫外波长时,需选用石英玻璃的比色皿。
2.如要对光谱图进行加减乘除、求导求对数、顶点及定点得数据、峰面积得计算等,在菜单“Manipulate”下处理。
3、测定时,如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏,要尽可能及时清理干净。
问题处理:
1、如果仪器不能初始化,关机(电脑及UVPC)重启;如不成功,查看说明书;
2、如果数据或谱图波动大,依次检查:调零是否正确(重新调零)、狭缝宽度是否过窄(加大狭缝宽度)、参比样值是否过大(如果吸收值大于2.0,可能会出现波动大)、光源是否有误(必要时,更换光源)。
3、如果基线不能平整,依次检查:调零是否正确(重新调零)、扫描速度是否过快(改“Fast”扫描为“Medium”扫描或更低)、波长范围是否过窄(扩大扫描波长范围)、比色皿是否更换(如更换,则重新调零)。
4、如果吸收值异常,依次检查:波长设置是否正确(重新调整波长,并重新调零)、测量时是否调零(如被误操作,重新调零)、比色皿是否用错(测定紫外波段时,要用石英比色皿)、样品准备是否有误(如有误,重新准备样品)。
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