液相色谱仪的工作过程简析
作者:2015/9/21 1:00:13

液相色谱仪的工作过程为:高压泵将贮液器(或槽、罐)中的流动相溶剂经进样器送入色谱柱,然后从控制器的出口流出(通常要回收)。当注入待测样品时,流经进样器的流动相将样品各组分带入色谱柱中进行分离,分离后的各组分依一定的顺序进入检测器,检测器产生的信号由记录仪记录下来,***后形成液相色谱图。 

1高压输液泵 

这是HPLC仪器中的着急部件之一。它一般由贮液器、高压输液泵、过滤器等组成。高压输液泵应该具备密封性好、输出流量恒定、压力平稳、可调范围宽、便于更换溶剂及耐腐蚀等条件。常用的输液泵有恒流泵和恒压泵两种,而恒流泵用的较多(因为它的输出流量能始终保持恒定,与色谱柱引起的阻力大小无关),而恒压泵用的较少。恒流泵又分为机械***泵和机械往复泵,后者用的***多。 

2进样系统 

由于HPLC色谱柱比GC色谱柱短的多(约5~30cm),所以,引起色谱峰峰形变宽的因素以柱外因素为主(即:进样系统、连接管道及检测器中存在的死体积)。而柱外展宽(色谱柱外因素引起的峰形变宽)又分柱前和柱后展宽,以进样系统所引起的柱前展宽为主要因素。 

3分离系统 

色谱柱是其核心部件之一。通常用φ4~5mm,5~30cm长度的不锈钢管作高压色谱柱,内装5~10μm的全多孔型微粒固定相。

4检测系统 

用于液相色谱的检测器有两类,一类是溶质型检测器,它仅对被测组分的物理或化学特性有响应,属于此类的有:紫外、荧光及电化学检测器等。另一类是总体检测器,它是对试样及洗脱液总的物理或化学性质有响应,属于此类的有: 示差折光、电导等检测器。在实际工作中, 应根据具体情况来选择适宜的检测器。而在HPLC仪器的常规分析中,紫外检测器用的***多。 除了这四大部分之外,还有一些附属的(有的甚至是不可缺少的)部件,如:脱气、梯度淋洗、自动进样、恒温、馏分收集及数据处理等装置。


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