武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

机体被微生物感1染后，先产生IgM抗1体，然后产生IgG抗1体。经过一段时间，IgM抗1体量逐渐减少而消失，而IgG抗1体可长期存在，在***痊愈后可持续数年之久。

IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定，对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。

1.3　抗原抗1体反应

1.3.1　可逆性

抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：

Ag Ab→Ag·Ab

抗1体的亲和力（affinity）是抗原抗1体间的固有结合力，可以用平衡常数K表示：

K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]

Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性，因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中，特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体，称为亲和层析纯抗1体，应用于***测定中可得到更好的效果。

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3、染色弱 原因 解决办法 抗1体浓度过低，孵育时间过短 提高抗1体浓度，孵育时间不能少于60分钟 ***超过有效使用期 及时更换*** 操作中，滴加***时缓冲液未沥干，酶联******盒价格，致 使***稀释 每步滴加***前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥） 室温太低，低于15℃ 若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰 箱过夜） 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验，设立阳性对照 ***中无抗原 设立阳性对照片，以验证实验结果 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗与二抗种属无误

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3、 细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

4、 细胞裂解液

1） 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2） 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3） 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

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