武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

在反应产物中有与Ag结合的Ab※和游离和Ab※ ，如不将两者分离而测定标记物，测得的结果将为两者之和。因此，游离标记物与结合标记物的分离是标记***测定中的重要步骤。可采用多种手段，固相载体是其中之一。如将抗原或抗1体包被在固相载体上，然后再与标记的抗原或抗1体直接反应，结合的标记物被固定在载体上，而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的Ab※除去，结合标记物的测定可在固相上进行。

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6．酶***测定

酶***测定（enzymeimmunoassay）可分为均相（homogenous）和非均相（heterogenous）两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下，抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力，因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需***行游离的和结合的标记物的分离。如前所述，固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶***测定方法在1971年***1初建立时称为酶联***吸附剂测定（enzymelinked immunosorbent assay），GAELISA***盒，简称ELISA，在国内有译作酶联***吸附试验的，虽然含义不完全确切，但已习用。

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假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，ELISA***盒，例如HBsAg的a决定簇，GCELISA***盒，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。

　　双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子（RF）的干扰。RF是一种自身抗1体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗1体和酶标抗1体结合，表现出假阳性反应。采用F（ab'）或Fab片段作酶结合物的***，8-OHdG ELISA***盒，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响，已被列为这类***的一项考核指标（参见6.2）。

　　双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。

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