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作者:默沙克2020/7/28 12:54:15






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机体被微生物感1染后,先产生IgM抗1体,然后产生IgG抗1体。经过一段时间,IgM抗1体量逐渐减少而消失,而IgG抗1体可长期存在,在***痊愈后可持续数年之久。

IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。

1.3 抗原抗1体反应

1.3.1 可逆性

抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:

Ag Ab→Ag·Ab

抗1体的亲和力(affinity)是抗原抗1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:

K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]

Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在反应产物中有与Ag结合的Ab※和游离和Ab※,如不将两者分离而测定标记物,测得的结果将为两者之和。在抗血1清中,特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于***测定中可得到更好的效果。





(2)有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。

(3)固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1-2次新液。

(4)材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,并随同材料在溶液中投入相应的标签,以免相互混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字,应用黑色铅笔或绘图黑墨水书写。

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镊子触质粒由硬变韧性为准。





17.脱水Ⅱ

将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色,然后放入无水乙醇中3-5min。后用吸水纸吸干多余的乙醇。

18.透明

切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。

二甲本应尽量保持无水,应经常更换,或用纱布包无水硫1酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲本中出现白雾现象,说明脱水未尽,应退回乙醇中重新脱水,否则切片难以镜检。

19.封藏:中性树胶封存

因切片经二甲本透明,使用中性树胶作为封藏剂,树胶可用二甲本稀释至合适的稠度。





 双抗1体夹心法是检测抗原1常用的方法,操作步骤如下:

  1)将特异性抗1体与固相载体联结,形成固相抗1体。洗涤除去未结合的抗1体及杂质。

  2)加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗1体结合,形成固相抗原抗1体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

  3)加酶标抗1体,保温反应。固相***复合物上的抗原与酶标抗1体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗1体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。



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