武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
两种多肽都释放进入血循环。两者来源相同并且等摩尔分泌。因此,从理论上讲,检测BNP和NT-proBNP的临床应用结果是相同的。而且从多年的临床结果来讲,也并不存在太大的区别。
在临床中,从心衰诊断这个角度来讲二者是没有区别的。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。但不存在差异是不可能的,以统计学来分析两者的差异很小。美国《临床化学》杂志在2007年发表了一篇论1文,题目是《BNP和NT-proBNP在急慢性HF中的诊断精1确性比较》,经过大量的文献统计得出如下结论:BNP和NT-proBNP化验在急性和慢性HF的诊断上具有较高的诊断精1确性并具有较高的相关性。
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7.为什么有的***盒是采用竞争ELISA法?
小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗1体夹心法进行测定,可以采用竞争法。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗1体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的生物素化抗1体愈少,后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激1素等ELISA测定多用此法。
采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免***污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
2、 血浆
用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血1脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读***盒说明书,检查***盒是否对抗凝剂有特殊要求。
假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。3)加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑1制剂)重悬细胞。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。
双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗1体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。透明注意事项(1)使用透明剂时,要随时盖紧盖子,以免空气中的水分进入。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗1体和酶标抗1体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的***,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响,已被列为这类***的一项考核指标(参见6.2)。
双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
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