武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

1、染色过强 原因 解决办法 抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长 降低抗1体滴度（一般指浓缩性抗1体）抗1体孵育时间：室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准 2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 ***中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭，孵育时间延长 ***中含内源性生物素 正常非***动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间

采血过程中应避免溶血，因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质，在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色，而导致检测的不准确性。同时也应避免***污染，因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。

2、 血浆

用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min，取上清即血浆。将上清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。避免使用溶血或高血1脂的标本。

常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等，检测时还应仔细阅读***盒说明书，检查***盒是否对抗凝剂有特殊要求。

17．脱水Ⅱ

将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色，然后放入无水乙醇中3-5min。后用吸水纸吸干多余的乙醇。

18．透明

切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。

二甲本应尽量保持无水，应经常更换，或用纱布包无水硫1酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲本中出现白雾现象，说明脱水未尽，应退回乙醇中重新脱水，否则切片难以镜检。

19．封藏：中性树胶封存

因切片经二甲本透明，使用中性树胶作为封藏剂，树胶可用二甲本稀释至合适的稠度。