武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

三．实验材料

仪器设备：1．酒精灯、三角烧瓶，培养皿；2．镊子、剪刀、剖针；3．双筒解剖显微镜；4．光照培养箱或温室；

材料烟1草无菌苗、豌豆幼苗。

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（1）MS培养基，植物激1素：NAA、6-BA等；

（2）饱和漂液（次氯1酸钠）；

（3）70%酒精、100%酒精、酒精棉球；

（4）无菌水

四．实验步骤

豌豆苗的茎尖培养

⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株，简取1厘米左右的茎尖，浸入70%的酒精中1分钟，再浸入饱和次氯1酸钠溶液中消毒15分钟，（此步以后要求无菌）用无菌水中冲洗5次，在灭菌的滤纸上吸干水分，放入灭菌的培养皿中。

在反应产物中有与Ag结合的Ab※和游离和Ab※ ，如不将两者分离而测定标记物，测得的结果将为两者之和。因此，游离标记物与结合标记物的分离是标记***测定中的重要步骤。可采用多种手段，固相载体是其中之一。如将抗原或抗1体包被在固相载体上，然后再与标记的抗原或抗1体直接反应，结合的标记物被固定在载体上，而游离的标记物留于溶液中。2、缺点：相比客户购买***盒后自行测定，代测需要另外***人工费，总体支出明显增加，仅适合于经费相对充足的客户。这样可以通过洗涤将游离的Ab※除去，结合标记物的测定可在固相上进行。

　4）加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗1体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗1体的来源为抗血1清，包被和酶标用的抗1体1好分别取自不同种属的动物。第1步，确认你的需要检测指标的名称（中文名称/英文名称/别名）。如应用单克1隆抗1体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗1体一起保温反应，作一步检测。

　2.　ELISA的类型

　　ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗1体。在这种测定方法中有三个必要的***：（1）固相的抗1菌素原或抗1体，即'***吸附剂'（immunosorbent）；室温高时促进染色，染色时间可短些，否则可适当延长时间，冬季室温低时可放入恒温箱中染色。（2）酶标记的抗原或抗1体，称为'结合物'（conjugate）；（3）酶反应的底物。根据***的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型：