武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
3、染色弱 原因 解决办法 抗1体浓度过低,孵育时间过短 提高抗1体浓度,孵育时间不能少于60分钟 ***超过有效使用期 及时更换*** 操作中,滴加***时缓冲液未沥干,致 使***稀释 每步滴加***前沥干切片中多余的缓冲液(但防止切片干燥) 室温太低,低于15℃ 若室温低于15度,要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟(或4℃冰 箱过夜) 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验,设立阳性对照 ***中无抗原 设立阳性对照片,以验证实验结果 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗与二抗种属无误
注意事项:
1. ***盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间1好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
④ 另取洁净的载玻片,捞起展开的切片,使其位于切片1/3处,另一端(磨边,粗糙的一端)磨面上标记或贴上标签,放于切片架上。
10. 脱蜡复水
将温箱温度调至65℃,待温度控制在60℃时,将切片连同切片架放入干燥的温箱内3-5小时至蜡熔化。
之后,石蜡切片经脱蜡透明Ⅰ、Ⅱ脱蜡各20min,勿动(防治***掉)此步为关键步,请轻拿轻放。然后放入100%、95%、90%、80%、70%各级酒精溶液中各5min
11. 染色
切片放入苏1木1精中染色约10-30min。
染色时间应根据染色剂的成熟程度及室温高低,适当缩短或延长。室温高时促进染色,染色时间可短些,否则可适当延长时间,冬季室温低时可放入恒温箱中染色。
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