武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
目前市场上的ELISA***盒质量参差不齐,如何去挑选适合自己的***盒就显得特别重要,具体有以下几点可供参考:
一、特异性
ELISA***盒的特异性与***盒的关键组分,抗1体对有关,若抗1体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。
二、灵敏度
灵敏度反映的是***盒检出被检物质的1低量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的***盒,如果待检指标量很低,一般的***盒不能满足要求,可选择高敏的ELISA***盒。
三、重复性
科学实验讲求重复性,一般ELISA***盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。
四、简便性
***盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎!这也不妨作为选择***盒的一个指标。
3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、 细胞裂解液
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑1制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
双抗1体夹心法是检测抗原1常用的方法,操作步骤如下:
1)将特异性抗1体与固相载体联结,形成固相抗1体。洗涤除去未结合的抗1体及杂质。
2)加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗1体结合,形成固相抗原抗1体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3)加酶标抗1体,保温反应。固相***复合物上的抗原与酶标抗1体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗1体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
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