武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
NT-proBNPlt;300pg/ml为正常,可排除心衰,其阴性预测值为99%。心衰治1疗后NT-proBNP<200pg/ml提示预后良好。肾1功能不全,肾小球滤过率lt;60ml/min时NT-proBNP 1200pg/ml诊断心衰的敏***和特异性分别为85%和88%。Elisa生物试验是一种敏***高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。NT-proBNP值正常可以排除心衰(阴性预测值接近100%)NT-proBNP有助于区分心源性和非心源性呼吸困难 NT-proBNP值的高低与伴有呼吸困难心衰的症状严重程度相关在急性心衰的诊断中,NT-proBNP明显优于临床判断,而二者联合的方法又优于单一诊断方法。
3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、 细胞裂解液
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑1制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4) 吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
6、 尿液、唾液等其他液体生物样本
1000×g离心20min,取上清即可检测。
总的来说,因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。
为了保证检测的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本***1好在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。
另外,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会***HRP的活性,从而导致假阴性的结果。
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