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2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

3. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

5. 加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。

6. 温育：操作同2。

7. 洗涤：操作同4。

8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B050μl，轻轻震荡混匀，酶联******盒价格，37℃避光显色15分钟.

9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。

10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

2. 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如，两1性霉1素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0，8.0 mg/ml。

3. 每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

4. 确定抗1生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2～3代。

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心肌细胞首先合成108个氨基酸的BNP原，称之为proBNP（BNP前体）。在受到心肌细胞的刺激后（例如，心肌细胞拉伸），proBNP在蛋白酶作用下列解为NT-proBNP（氨基末端- proBNP或N端-proBNP）和生物活性激1素BNP。两种多肽都释放进入血循环。两者来源相同并且等摩尔分泌。

BNP与NT-proBNP的不同点主要有如下几点：

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