武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

【储存条件及有效期】

储存条件：2到8℃保存，避光。

有效期：12个月。

【自备仪器】

酶1标仪，移液器

【使用方法】

1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后，洗板3-5次，每孔加入底物显色液A，显色液B各50 μL（A、B液先混合再加入孔中），轻轻混匀，在37°C下温育10-30分钟。

2、每孔加入终止液，15 min内在450 nm波长处测定各孔溶液的OD值。

4.细胞上清液样本如何处理？

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（1000×g）。仔细收集上清。

5.细胞裂解液样本如何处理？

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或者超声破碎，以使细胞***并放出细胞内成份。离心10分钟左右（5000×g）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

6．透蜡

放入二甲本和石蜡各半的混合液60min，再放入石蜡Ⅰ60分钟、石蜡Ⅱ透蜡30分钟。

透蜡的目的是除去***中的透明剂（如二甲本等），使石蜡渗透到***内部达到饱和程度以便包埋。透蜡时间根据***大小而定。透蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在55-60℃左右，注意温度不要过高，以免***发脆。一般置于恒温箱0.5h。

透蜡注意事项

（1）尽量保持在较低温度中进行，以石蜡不凝固为度；

（2）透蜡温度要恒定，不可忽高忽低；

（3）操作要迅速，力求在***1短的时间内完成石蜡透入过程，以免引起***变硬、变脆、收缩等。