武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

3、染色弱 原因 解决办法 抗1体浓度过低，孵育时间过短 提高抗1体浓度，孵育时间不能少于60分钟 ***超过有效使用期 及时更换*** 操作中，滴加***时缓冲液未沥干，致 使***稀释 每步滴加***前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥） 室温太低，低于15℃ 若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰 箱过夜） 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验，设立阳性对照 ***中无抗原 设立阳性对照片，以验证实验结果 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗与二抗种属无误

2) 激1素，包括小分子量的甾体激1素等。

3) 抗生1素和药1物。

4) 病原体抗原，HBsAg、HBeAg等。

5) 另外，也可利用纯化的抗原检测标本中的抗1体，例如抗-HBs等。

5．标记的***测定

如上所述，***测定是一种很敏感的测定方法，抗原抗1体反应后直接测定形成的沉淀或浊度，敏感度可达5~10μg/ml，但在临床检验中，某些待测物在标本中的含量远低于这一水平，因此要寻找增加敏感度的方法。标记的***测定是将检测***中的抗原或抗1体用可微量测定的物质加以标记，通过测定标记物来提高敏感度。在放1射***测定和酶***测定中，标记物分别为放1射性核素和酶，***后用测定放1射性和酶活力来计算待检物的量，敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记***测定中，一般加入过量的标记***以保证与待测物彻底反应。但发展至今，其范围日益扩大，已包括植物和它的离体器1官、***、细胞和原生质体的离体无菌培养。以标记抗1体（Ab ※）检测抗原（Ag）为例，反应式如下：

12．水洗

用自来水流水冲洗约15min。使切片颜色变蓝（或放入碱性水中也可），但要注意流水不能过大，以防切片脱落。

13．分化

将切片放入1%盐酸乙醇液中褪色，约2秒至数十秒钟。见切片变红，颜色较浅即可。

14．漂洗

切片再放入自来水流水中使其***蓝色。

15．脱水Ⅰ

切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各5min。

16、复染

用0.5%伊红乙醇液对比染色1-3min。

伊红主要染细胞质，着色浓淡应与苏1木1精染细胞核的浓淡相配合，如果细胞核染色较浓，细胞质也应浓染，以获得鲜明的对比。反之，如果细胞核染色较浅，细胞质也应淡染。可在伊红乙醇液中滴加数滴冰醋酸助染，促使细胞质容易着色，并且经乙醇脱水时不易褪色。【自备仪器】酶1标仪，移液器【使用方法】1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后，洗板3-5次，每孔加入底物显色液A，显色液B各50μL（A、B液先混合再加入孔中），轻轻混匀，在37°C下温育10-30分钟。