武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

三．实验材料

仪器设备：1．酒精灯、三角烧瓶，培养皿；2．镊子、剪刀、剖针；3．双筒解剖显微镜；4．光照培养箱或温室；

材料烟1草无菌苗、豌豆幼苗。

***

（1）MS培养基，植物激1素：NAA、6-BA等；

（2）饱和漂液（次氯1酸钠）；

（3）70%酒精、100%酒精、酒精棉球；

（4）无菌水

四．实验步骤

豌豆苗的茎尖培养

⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株，简取1厘米左右的茎尖，浸入70%的酒精中1分钟，再浸入饱和次氯1酸钠溶液中消毒15分钟，（此步以后要求无菌）用无菌水中冲洗5次，在灭菌的滤纸上吸干水分，放入灭菌的培养皿中。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

3. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

5. 加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。

6. 温育：操作同2。

7. 洗涤：操作同4。

8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B050μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。

10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

机体被微生物感1染后，先产生IgM抗1体，然后产生IgG抗1体。经过一段时间，IgM抗1体量逐渐减少而消失，而IgG抗1体可长期存在，在***痊愈后可持续数年之久。

IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定，对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。

1.3　抗原抗1体反应

1.3.1　可逆性

抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：

Ag Ab→Ag·Ab

抗1体的亲和力（affinity）是抗原抗1体间的固有结合力，可以用平衡常数K表示：

K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]

Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。心衰治1疗后NT-proBNP＜200pg/ml提示预后良好。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性，因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中，特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体，称为亲和层析纯抗1体，应用于***测定中可得到更好的效果。