武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

6.***样本如何处理？

用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗***，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将***剪碎。将剪碎的***与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的***样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。3）加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。推荐在PBS中加入蛋白酶抑1制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解***细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。***后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。

3、 细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

4、 细胞裂解液

1） 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2） 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3） 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。

6．透蜡

放入二甲本和石蜡各半的混合液60min，再放入石蜡Ⅰ60分钟、石蜡Ⅱ透蜡30分钟。

透蜡的目的是除去***中的透明剂（如二甲本等），使石蜡渗透到***内部达到饱和程度以便包埋。透蜡时间根据***大小而定。透蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在55-60℃左右，注意温度不要过高，以免***发脆。一般置于恒温箱0.5h。

透蜡注意事项

（1）尽量保持在较低温度中进行，以石蜡不凝固为度；

（2）透蜡温度要恒定，不可忽高忽低；

（3）操作要迅速，力求在***1短的时间内完成石蜡透入过程，以免引起***变硬、变脆、收缩等。