武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

3. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

5. 加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。

6. 温育：操作同2。

7. 洗涤：操作同4。

8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B050μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。

10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

（1）分子结构不同：BNP的分子结构中有一个非常重要的二硫键连接构成的环状结构，可与钠尿肽受体结合发挥生物学活性作用；NT-proBNP为一直链结构，是失去生物活性的氨基酸片段。

（2）在体内的清除途径不同：BNP的清除主要通过与钠尿肽清除受体（NPR-C）结合继而被胞吞和溶酶体降解，只有少量的BNP通过肾1脏清除，当肾1功能缺失时，中性肽链内切酶（NEP）也可打开BNP的环状结构而对它进行清除；（6）脱水必须彻底，否则不易透明，甚至使透明剂内出现白色混浊现象5．透明（环保透明脱蜡液）武汉默沙克纯酒精、二甲本等量混合液15min，二甲本Ⅰ60min、Ⅱ30min（至透明为止）。NT-proBNP清除的唯1途径是肾小球滤过，肾1功能出现缺失对NT-proBNP的代谢影响极大。

1.3.2　***适比例

在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物（沉淀）的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗1体比例合适的范围，称为等价带（zone ofequivalence）。在等价带前后分别为抗1体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗1体极度过剩，则无沉淀物形成，在***测定中称为带现象（zone phenomenon）。抗1体过量称为前带（prezone），抗原地过量称为后带（p1ostzone）。⑧用单面刀片切取蜡片一小段，放在载玻上加水一滴，置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。在用***学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗1体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。