武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
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【预期用途】
适用于酶联***反应中的显色阶段。
【检验原理】
原理是应用酶联***学基本原理——当标记在抗1体或抗原上的酶与显色液中的TMB、H2O2等反应,加入终止液后溶液由无色变成***,***深浅反应ELISA体系中抗原抗1体结合的多少,从而判断某种抗原或抗1体的多少。室温高时促进染色,染色时间可短些,否则可适当延长时间,冬季室温低时可放入恒温箱中染色。在通过酶1标仪测读吸光值,判断***反应的程度。
【主要组成成份】
底物显色液A液:柠檬酸,30%H2O2
底物显色液B液(避光保存):EDTA-Na,柠檬酸,甘油 ,TMB。
3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、 细胞裂解液
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑1制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
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