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3.工作浓度的选择在***酶技术中,首先要确定的变异因素就是酶标记物的工作浓度。因为酶标记物浓度的很小变化,便可导致试验结果产生很大的波动。另外,由于浓度过高,可使非特异性反应增加,而浓度过低又可影响测定的敏***。因此,正式试验前必须准确滴定其工作浓度。酶标记抗1体的滴定方法是:将抗原(或抗1体)物理吸附于固相载体上,然后将经过一系列稀释的酶标抗1体(或抗Ig抗1体)与吸附在载体上的抗原(或抗1体)起反应,以酶与底物的显色反应程度来确定酶标记抗1体的效价,或称工作浓度。HBsAg***特点(检测模式:临床抗1体夹心法):包被抗1体为山羊多抗。多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。酶表抗1体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,可测得HBsAg变异样品,提高检测的特异性(99.98%)提高检测的灵敏度,应用ParlEhrich学说(PEI)HBsAg标准品,对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml3).丙1酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙1酮,放置片刻,兔elisa***盒,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙1酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙1酮。可得RZ值近于1的酶溶液。4).精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L***锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10-3mol/L,5000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米***纤维状松软物,HRP产品的?RZ?值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。?3y;~/O3zBamp;A1d默沙克(多图)-兔elisa***盒由武汉默沙克生物科技有限公司提供。武汉默沙克生物科技有限公司()是从事“ELISA***盒,生化***等”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供优质的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:莫经理。)
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