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2.标准曲线线性不佳,或是平行性不好。a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。解决办法:请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。b.原因:操作时间拖太久。解决办法:请在方法熟练后再进行操作。c.原因:微孔间相互污染。解决办法:加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。e.原因:添加样品或***的操作方法不正确。解决办法:加样品或***时,吸头请勿接触微孔。f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。解决办法:请随时监控洗板1机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。3.吸光值均偏高(或线性不够陡)。a.原因:室温太高(gt;25℃)。解决办法:若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。b.原因:底物溶液受到污染。解决办法:若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用。c.原因:反应时间超过太久。解决办法:请控制反应时间。d.原因:酶标记物污染了盒内其它***。解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避免***间相互污染,凡是***(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)4.阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。a.原因:微孔中的***未能充分混合。解决办法:***加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀。b.原因:洗板过程发生问题(同2-f.)。解决办法:请参考2-f.c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。解决办法:请参考2-d.一、ELISA实验通用规则1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但***1好有***人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。3、要在实验前1小时将***盒从冰箱中取出,使各种***都***到室温,以使结果更稳定。4、实验时,要使底物避光保存。5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶1标仪的晃动功能。9、温浴时,兔elisa***盒,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板1机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。12、底物是光敏感的,要在临用前现配。4.注意事项1.在具备高质量HRP的条件下,所要标记的抗1体也要活性高,效价高(***1低1∶16),纯度高,亲和力好,这是保证标记物效价高,***活性好的首要条件。i!t${2f0g8|2.所使用***的PH和浓度及用量必须严格掌握。所用***,***1好(或必需)新鲜配制。如在戊二1醛标记法中所用戊二1醛应为新鲜纯品,因戊二1醛储存过久可形成缩和体(杂质)。否则,影响标记效果。3e0t3r9d/KH9O;Jl3.室温搅拌时须避光,室内温度一般在25℃为宜。标记物每次透析前,须认真检查,防止漏液。4.浓的标记物相当稳定,常加入30~40%甘油于-10℃下保存。4℃可保存1~2年,但稀释成1∶10,只能保存数周。已配制的使用液应在12小时内用完。切忌反复冻融。兔elisa***盒-默沙克(推荐商家)由武汉默沙克生物科技有限公司提供。武汉默沙克生物科技有限公司()是从事“ELISA***盒,生化***等”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供优质的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:吴经理。)
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