叶绿素含量测定可能是一个***基本、***简单的测定对于植物生理特别是光合作用的研究中，任何一个看似简单的操作其实都有着不可小视和忽略的问题，就像叶绿素仪在使用时需要注意的问题也不少,诸如取材叶片的叶位、叶龄,分光光度计的分辨率和用于比色的叶绿素提取液浓度等。叶绿素含量测定http://www.ny-17.com/的简化基本步骤取样:用知道确切面积的模板或打孔器切取1cm2左右叶片(注意避开比较粗大的叶脉),切成长约5mm、宽约1mm的细丝。(2)浸提:将叶片细丝投入含5mL80%***的刻度试管中,封管口后于暗中提取至细丝完全变白色为止(过夜即可)。如果中间轻轻摇晃试管几次,则可以缩短提取时间。(3)比色:为弥补可能由于溶剂挥发带来的损失,可用80%***将上述提取液重新定容至后将管内溶液轻轻倒入比色杯中,按照Arno(1949)方法用光波长分辨率较高的分光光度计(本文用UV-120型分光光度计,日本Shimadzu公司制造)分别于663nm和645nm处读光密度(OD)。(4)计算:首先按Arnon(1949)的公式计算提取液的叶绿素浓度(CV,μg·mL-1)。Chla=12.7OD663-2.69OD645;Chlb=22.9OD645-4.86OD663;CV=Chla+Chlb。然后,按下式计算以单位叶面积表示的叶绿素含量(mg·dm-2):CA=CV1/1000×5×100/S=0.5CV/S。这里,CA和V的下标A和V分别代表面和体积,S为用于提取叶绿素的叶片面积(c2)