武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。1、染色过强原因解决办法抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长降低抗1体滴度（一般指浓缩性抗1体）抗1体孵育时间：室温1小时或4℃过夜孵育温度过高，孵育温度超过37℃一般室温20-28℃DAB显色时间过长或DAB浓度过高显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准2、非特异性背景染色原因解决办法操作过程中冲洗不充分每步冲洗3×5***中含过氧化物酶未阻断可再配置新鲜3%H2O2封闭，孵育时间延长***中含内源性生物素正常非***动物血1清再封闭血1清蛋白封闭不充分延长血1清蛋白封闭时间6.***样本如何处理？用预冷的PSB(0.01M,pH=7.4)冲洗***，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将***剪碎。如将抗原或抗1体包被在固相载体上，然后再与标记的抗原或抗1体直接反应，结合的标记物被固定在载体上，而游离的标记物留于溶液中。将剪碎的***与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的***样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑1制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解***细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。3.洗涤材料经固定后,PBS或双蒸水冲洗约3小时。（20，30，30，60）4.脱水材料依次经80%、90%、100%、100%各级乙醇溶液脱水，各30min注意事项：（1）脱水必须在有盖的玻璃品中进行，防止吸收空气中的水分。（2）在更换高一级的脱水剂时，1好不要移动材料以免损坏，可用吸管吸出器皿中的脱水剂，再用吸水吸尽器皿内剩余液，然后于皿中加入高一级脱水剂。（3）在低浓度酒精中，每级停留不宜太长，否则易使***变软，助长材料的解体。（4）在高浓度或纯酒精中，每级停留的时间也不宜太长，否则会使***变脆，影响切片。（5）如需过夜，应停留在80%酒精中。)