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武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。IgG可被木瓜蛋白酶分解为三个区段,其中两个相同的区段称抗原结合片段(Fab)。每个Fab都保存结合抗原的能力,但只有一个抗原结合位点,是单价的,与抗原结合后不出现凝集或沉淀。另一区段称Fc段,无抗1体活性,但具有IgG特有的抗原性。IgG可被胃蛋白酶分解为两个片段,一个Fab双体,称F(ab)2,能和两个相同的抗原结合;另一片段类似Fc,随后被分解成小分子多肽,无生物活性。IgM是由五个单体组成的五聚体,含10个重链和10个轻链,具有10个抗原结合价,由于空间位置的影响,只表现为五个抗原结合价。IgM分子量约为900000,IgG分子量约为150000。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。心肌细胞首先合成108个氨基酸的BNP原,称之为proBNP(BNP前体)。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗1体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。因此,游离标记物与结合标记物的分离是标记***测定中的重要步骤。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗1体和酶标抗1体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab)或Fab片段作酶结合物的***,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响,已被列为这类***的一项考核指标(参见6.2)。双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗1体及酶标抗1体结合,而不再形成夹心复合物。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗1体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2,图1-4),如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hookeffect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。用无热原、无内毒1素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血1清析出。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法***测定标本中含量可异常增1高的物质(例如血1清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的***1高值。用高亲和力的单克1隆抗1体制备此类***可削弱钩状效应。)
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