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武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。【预期用途】适用于酶联***反应中的显色阶段。【检验原理】原理是应用酶联***学基本原理——当标记在抗1体或抗原上的酶与显色液中的TMB、H2O2等反应,加入终止液后溶液由无色变成***,***深浅反应ELISA体系中抗原抗1体结合的多少,从而判断某种抗原或抗1体的多少。(4)无菌水四.实验步骤豌豆苗的茎尖培养⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株,简取1厘米左右的茎尖,浸入70%的酒精中1分钟,再浸入饱和次氯1酸钠溶液中消毒15分钟,(此步以后要求无菌)用无菌水中冲洗5次,在灭菌的滤纸上吸干水分,放入灭菌的培养皿中。在通过酶1标仪测读吸光值,判断***反应的程度。【主要组成成份】底物显色液A液:柠檬酸,30%H2O2底物显色液B液(避光保存):EDTA-Na,柠檬酸,甘油,TMB。【储存条件及有效期】储存条件:2到8℃保存,避光。有效期:12个月。【自备仪器】酶1标仪,移液器【使用方法】1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加入底物显色液A,显色液B各50?L(A、B液先混合再加入孔中),轻轻混匀,在37°C下温育10-30分钟。2、每孔加入终止液,15min内在450nm波长处测定各孔溶液的OD值。机体被微生物感1染后,先产生IgM抗1体,然后产生IgG抗1体。经过一段时间,IgM抗1体量逐渐减少而消失,而IgG抗1体可长期存在,在***痊愈后可持续数年之久。IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。1.3抗原抗1体反应1.3.1可逆性抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:AgAb→Ag·Ab抗1体的亲和力(affinity)是抗原抗1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]Ag·Ab的解离程度与K值有关。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B050μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中,特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于***测定中可得到更好的效果。)
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