武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的，如血1清、血浆、尿液、细胞培养上清或***匀浆液等，不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。在实践应用上，常采用生长点的培养使患病植物去病毒，以达到挽救优良品种，提高产量和质量之目的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的第1步，下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。1、血1清血1清是***1常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。用无热原、无内毒1素的试管或离心管采集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血1清析出。（***1好将试管或离心管倾斜放置，使液面横截面增大，能使血1清更大程度的析出。⑵在双目解剖镜下，用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥，用灭菌的解剖针挑取带着两至三个叶原基的生长锥。）4℃1000×g离心20分钟，仔细收集上清。建议将血1清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。4）吸取匀浆液到离心管，4℃5000×g离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。6、尿液、唾液等其他液体生物样本1000×g离心20min，取上清即可检测。总的来说，因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量，所以应保证所有样本均为澄清的液体，沉淀或悬浮物都应离心去除。为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本***1好在1~6个月内检测；4℃保存的样本应在1周内进行检测。另外，还应保证样本不含NaN3，因为NaN3会***HRP的活性，从而导致假阴性的结果。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。之后，石蜡切片经脱蜡透明Ⅰ、Ⅱ脱蜡各20min，勿动（防治***掉）此步为关键步，请轻拿轻放。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子（RF）的干扰。RF是一种自身抗1体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗1体和酶标抗1体结合，表现出假阳性反应。采用F（ab）或Fab片段作酶结合物的***，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响，已被列为这类***的一项考核指标（参见6.2）。双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。)