武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。3、染色弱原因解决办法抗1体浓度过低，孵育时间过短提高抗1体浓度，孵育时间不能少于60分钟***超过有效使用期及时更换***操作中，滴加***时缓冲液未沥干，致使***稀释每步滴加***前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥）室温太低，低于15℃若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰箱过夜）蛋白封闭过度封闭时间不要超过10分钟4、染色阴性原因解决办法操作步骤错误重新试验，设立阳性对照***中无抗原设立阳性对照片，以验证实验结果一抗与二抗种属连接错误仔细确定一抗与二抗种属无误1．取材切取的***块不宜太大，以利于固定剂穿透，通常以6mm×6mm×5mm为宜。注意事项：（1）取材动作要迅速，不宜作太久的拖延以免***细胞的成分、结构等发生变化。（2）切片材料应根据需要观察的部位进行选，尽可能不要损伤所需要的部分。2．固定将切好的***用生理盐水***洗3次，立即投入10%中性1福尔1马林固定液或4%多聚甲醛中固定，固定36小时。（1）一般固定液，都以新配为好，配好后应贮存在阴凉处，不宜放在日光下，以免引起化学变化，失去固定作用。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。注意事项：1．***盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子（RF）的干扰。⑧用单面刀片切取蜡片一小段，放在载玻上加水一滴，置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。RF是一种自身抗1体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗1体和酶标抗1体结合，表现出假阳性反应。采用F（ab）或Fab片段作酶结合物的***，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响，已被列为这类***的一项考核指标（参见6.2）。双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。)