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武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免1疫学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免1疫学等生命科学领域。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度。1.在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。2.分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如,两1性霉1素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0mg/ml。3.每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。4.确定抗1生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2~3代。武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。1.2.1抗1体的结构抗1体是能与抗原特异性结合的***球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与***测定有关的Ig主要为IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第1孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请***后乘以总稀释倍数(×n×5)。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu)链。重链和轻链的N端的氨基酸排列顺序因各种抗1体而异,称为可变区,分别用VH和VL表示。两者构成抗1体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗1体专一性结合抗原的结构基础。1.3.3特异性抗原抗1体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗1体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。例如乙1肝1病毒中的表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗1体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗1体结合,而不与另外两种抗1体反应。通过绘制标准曲线,检测未知浓度的OD值,对应标准曲线找欲测目标物浓度。抗原抗1体反应的这种特异性使***测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血1清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。)