武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。六、美誉度一个品牌不光要有度，更重要的是美誉度。通过行业调1查公司以及网络，相关宣传资料等可以找到美誉度高的ELISA***盒供应商，这个反映的不仅是产品质量的问题，对供应商的售前***服务也是一个非常严格的检验。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第1孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请***后乘以总稀释倍数（×n×5）。目前国际上主要的ELISA供应商有Ramp;D细1胞因子方面的***盒，Bender粘附分子方面的***盒，Cayman花生四烯酸类产品的***盒，Merck(Linco)内1分泌研究方面的***盒，Invitrogen(Biosource)磷酸化蛋白的ELISA，动物细1胞因子ELISA***盒等，国内主要的ELISA***盒生产供应商有武汉，默沙克生物科技有限公司ELISA***盒操作步骤1.加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标***，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品***终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。IgG可被胃蛋白酶分解为两个片段，一个Fab双体，称F（ab）2，能和两个相同的抗原结合。2.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。IgG可被木瓜蛋白酶分解为三个区段，其中两个相同的区段称抗原结合片段（Fab）。双抗1体夹心法测抗原的另一注意点是类风1湿因子（RF）的干扰。RF是一种自身抗1体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗1体夹心法检测的血1清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗1体和酶标抗1体结合，表现出假阳性反应。6．酶***测定酶***测定（enzymeimmunoassay）可分为均相（homogenous）和非均相（heterogenous）两种类型。采用F（ab）或Fab片段作酶结合物的***，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗1体夹心法ELISA***是否受RF的影响，已被列为这类***的一项考核指标（参见6.2）。双抗1体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。)