层析柱装柱步骤流程1.计算每厘米柱床高度填料的数量；2.选择合适的配件和末端筛网，选择不合适的滤网可能导致较高反压或填料***；3.选择装柱流速首先：拍排泡第二：调水平第三：匀浆第四：装柱第五：绘制压力/流速曲线，装柱流速为大流速的70%-100%。柱效检测柱效主要取决于装柱质量。如果是离子交换或亲和层析填料，层析柱价格，则不能使用有色物质，如蓝色葡聚糖。表征柱效的两个指标是理论板当量高度（HETP）和对称因子As，使用N***或通过测定UV吸收或电导率进行计算。使用N***溶液进行测定，优点样品是易得、安全，层析柱供应，缺点是可能与填料发生反应，特别是离子交换树脂，因此影响测定结果。使用进行测定，其不与层析填料发生反应，并且可通过检测280nm处的紫外吸收进行测定，并且，测定缓冲液的浓度可提高至10倍。层析柱的操作方法以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例：1.吸附剂的处理及柱子装填将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5：95)比例泵入溶剂，至溶剂流出止。2.上样将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解，泵入中压柱柱头，然后泵入1000RID。3.洗脱以一定比例的一为洗脱液，60ML/MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～3KG/C。按每份500ML收集，TLC检识展开剂一(2：8)，显色剂5%香草醛乙醇液至洗脱完全，相同流份合并，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。4.层析柱再生、平衡有效成分经TLC检识全部流出后，用纯5000ML再生，一(5：95)平衡后，可再次上样，反复使用(使用次数随原料不同而异，一般可连续使用2—6个月以上)。5.重结晶冬凌草甲素结晶析出完全后，减压过滤，然后用少量洗涤(洗涤液保留，作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置，结晶再次析出，待结晶完全后，抽滤，用少量洗涤，将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。6.薄层层析分析取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶G薄层板上，以一(8：2)为展开剂进行展开，5%香草醛乙醇液显色，于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。层析柱的操作方法以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例：1.吸附剂的处理及柱子装填将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5：95)比例泵入溶剂，至溶剂流出止。2.上样将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解，泵入中压柱柱头，然后泵入1000RID。3.洗脱以一定比例的一为洗脱液，60ML/MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～3KG/C。按每份500ML收集，TLC检识展开剂一(2：8)，显色剂5%香草醛乙醇液至洗脱完全，相同流份合并，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。4.层析柱再生、平衡有效成分经TLC检识全部流出后，用纯5000ML再生，一(5：95)平衡后，层析柱厂家，可再次上样，反复使用(使用次数随原料不同而异，一般可连续使用2—6个月以上)。5.重结晶冬凌草甲素结晶析出完全后，减压过滤，然后用少量洗涤(洗涤液保留，作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置，结晶再次析出，待结晶完全后，抽滤，用少量洗涤，将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，天津层析柱，置干燥器中保存。6.薄层层析分析取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶G薄层板上，以一(8：2)为展开剂进行展开，5%香草醛乙醇液显色，于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。层析柱供应-天津层析柱-天津龙鼎世纪轻工设备由天津龙鼎世纪轻工设备有限公司提供。层析柱供应-天津层析柱-天津龙鼎世纪轻工设备是天津龙鼎世纪轻工设备有限公司今年新升级推出的，以上图片仅供参考，请您拨打本页面或图片上的联系电话，索取联系人：王经理。)