亲和层析柱装柱注意事项一文了解亲和层析柱装柱注意事项1.洗脱亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。（1）特异性洗脱特异性洗脱是指利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的亲和特性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。特异性洗脱也可以分为两种：一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱，另一种是选择与待分离物质有亲和力的物质进行洗脱。前者在洗脱时，选择一种和配体亲和力较强的物质加入洗脱液，这种物质与待分离物质竞争对配体的结合，层析柱生产厂家，在适当的条件下，如这种物质与配体的亲和力强或浓度较大，配体就会基本被这种物质占据，原来与配体结合的待分离物质被取代而脱离配体，从而被洗脱下来。例如用凝集素作为配体分离糖蛋白时，层析柱，可以用适当的单糖洗脱，单糖与糖蛋白竞争对凝集素的结合，可以将糖蛋白从凝集素上置换下来。层析柱装柱、使用及相关注意事项关于层析柱装柱、使用及相关注意事项（1）、装柱前要仔细看填料的使用说明书，每种填料都有自己的特性，以及特殊的装柱方法，层析柱生产商，针对不同的空柱，也要注意方法可能不同；这一点非常重要：装柱包括以后使用中不允许柱内进入气泡（bubblefree），柱头事先也要排除气泡。（2）、填料要加水搅拌成均匀悬液，悬液浓度依填料而不同，一般70－85%，迅速倒入空柱内，或吸或压，流速和具体步骤看说明书。（3）、所有柱子尽量做到填料均匀，尤其是用于凝胶层析的柱子。装柱完成后，可用柱效测定的方法检查装填效果。一个装填合格的柱子的理论塔板高度应是填料平均粒径的2－4倍，层析柱供应，在此范围内越小越好。（4）、选择合适的泵，**是流速满足要求，脉冲尽量小。柱塞泵。（5）、准备上柱的液体应进行过滤，至少是0.45micrometre。（6）、关于纯化，**要考虑的是你的目标：纯度、数量、速度、收率等等，再根据样品的具体情况，尤其是目标蛋白的性质，确定纯化策略。通常三步曲：capture、purification、polishing。*步先从大量或复杂样品中将目标蛋白%26ldquo;抓出%26rdquo;，与主要杂质分离；再用高选择性的层析去除绝大部分杂质；后精细纯化，提供纯度至设定目标。到实际工作中，不要死靠三步，也许一步也许四步或更多，具体情况具体分析。所谓%26ldquo;三步%26rdquo;只是一种思路而已。（7）、至于测序，我想大概不到1mg应该足够了。层析柱进气泡怎么办？空气进入，如缓冲液走空，连接进入系统过程中用纯水反向冲洗，如果有柱位阀可直接切换流向，没有的话可将柱子反接对于大多数层析柱来说可用乙醇冲洗，以提高排气效率缓冲液中有气泡上柱前将缓冲液脱气在缓冲液入口使用空气感应器温度影响，如在冷室操作后马上在室温操作，或低温缓冲液直接在室温使用缓冲液在使用前达到热平衡层析柱-龙鼎世纪-层析柱供应由天津龙鼎世纪轻工设备有限公司提供。层析柱-龙鼎世纪-层析柱供应是天津龙鼎世纪轻工设备有限公司今年新升级推出的，以上图片仅供参考，请您拨打本页面或图片上的联系电话，索取联系人：王经理。)