细胞冷冻保存，1.材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(SigmaD-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene5000-0020)、0.4%(w/v)trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-80℃16～18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃以下)-120℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。冷冻前，首先要提前对冻存者本人做各种健康检查，同时进行筛查，包括、丙肝、支原体、衣原体、肝功能和血型检测等。然后，如一切结果无明显异常，可进行冻苏实验。每个男性对冷冻的耐受性有所不同，冷冻复苏后的存活率无法估计。因此，冻苏实验十分必要，可帮助医生预测以后生育方式的选择。冷冻与冷冻***其他***一样，就是将和冷冻保护剂的混合物吸入冷冻管内，程序胚胎冷冻仪，封口后放入程序降温仪内按设定好的降温程序降温，封闭于液氮罐，从此进入了长时间的“冬眠”状态。程序降温仪的密封性和绝缘性，功率和对数据参数的恒定管理，可以让用户来决定佳的冷冻曲线，并且能提供简单的重复性。温度由两个探针（腔室和产品）恒定并且的监测，从而确保无暇地控制主要的冷冻程序。产品特点：高可靠性由IMV卡苏科技设计和制造带速释探头的Eurotherm温度控制器氮连接器，航空级科技完全绝缘的容器（304L抛光不锈钢，内附高密度膨胀聚氨酯泡沫绝缘体）∶样本和受控的氮消耗不会造成冷冻速率的损失。北京程序胚胎冷冻仪-倍玛特(推荐商家)由合肥倍玛特仪器设备有限公司提供。合肥倍玛特仪器设备有限公司位于合肥市经开区观海路南湖春城南门门面房1-102。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前倍玛特在实验仪器装置中享有良好的声誉。倍玛特取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。倍玛特全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)