步骤：(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、，逐滴加入二亚砜(DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞，用加的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO***后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ml，混合均匀，分装于已标示完全之冷冻保存管中，1～2ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，广东程序降温仪，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。在细胞冻存的过程中，液态水转化为冰，细胞代谢停止。同时，水分也随之散失，导致细胞内盐、代谢物浓度改变，全自动程序降温仪，进而造成渗透压失衡，直接影响冻存细胞的复苏。同时，冷冻速率太快或太慢，容易导致细胞内水分丧失或形成大冰晶，都不利于细胞存活。通过使用程控降温仪，选择合适的冻存液，细胞程序降温仪，设定合适的升降温速率，液氮程序降温仪，可有效地克服上述不利因素。实践证明，（经温度补尝后）每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。细胞往往会在温度剧烈变化中。通过使用细胞欣谕程序降温仪，选择合适的冻存液，设定合适的升降温速率，可有效地克服上述不利因素。实践证明，（经温度补尝后）每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。传统的生物样本降温通常采用-80℃低温冰箱进行分步骤冷冻，该方法的不足为：耗时长，整个降温过程大约需要一天的时间；在降温过程中需要人为多次转移，给样本的降温带来众多不可控因素，从而导致样本的存活率降低；无法有效地消除结晶过程中释放的潜热，增大了样本的率。广东程序降温仪-合肥倍玛特|***无忧-全自动程序降温仪由合肥倍玛特仪器设备有限公司提供。合肥倍玛特仪器设备有限公司实力不俗，信誉可靠，在安徽合肥的实验仪器装置等行业积累了大批忠诚的客户。倍玛特带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！)