【摘要】目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克0隆抗0体(AFP—McAb)杂交瘤细胞系的方法。方法以常规和改良两种方式同时免0疫8～12周Balb／c小鼠，取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞SP2／0融合并行次黄piao呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。用间接酶链免0疫吸附试验法(EI。ISA)筛选阳性克0隆株，并建立细胞系。结果在较短时间内，改良法能获得高0效价的免0疫抗0体，与常规免0疫法相比有极显著差异(P<0．001)，同时改良法的细胞融合率和抗0体阳性率也显著高于常规免0疫法(P<o．001)。筛选获得的高0效分泌抗人AFP—McAb的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。结论新的改良方法优化了常规的McAb制备中动物免0疫程序，并能成功筛选出AFP—McAb杂交瘤细胞系。抗果蝇MRJ蛋白单克0隆抗0体的制备和鉴定摘要:制备抗果蝇MRJ蛋白单克0隆抗0体可用于研究果蝇mrj的生物学功能，转染试剂盒，使用IPTG诱导重组质粒pET28a-mrj在大肠杆0菌Rosetta中表达，重组蛋白经过Ni-IDA凝胶柱亲和纯化后免0疫BALB/c小鼠。然后取免0疫好的小鼠的脾0脏细胞与小鼠骨0髓瘤细胞SP2/0融合，经克0隆和筛选获得了能分泌抗果蝇MRJ蛋白单克0隆抗0体的杂交瘤细胞株。腹0水制备后获得单克0隆抗0体，通过ELISA和WesternBlot对所获得的抗0体进行鉴定，结果表明所制备单克0隆抗0体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的MRJ蛋白，可用于研究mrj基因的生物学功能。关键词:mrj;细胞融合;单克0隆抗0体细胞融合取已免0疫小鼠的脾0脏用不完全培养基制成细胞悬液，计数。收集选择生长状态良好的SP2/0骨0髓瘤细胞，制成细胞悬液，计数。将SP2/0骨0髓瘤细胞与免0疫小鼠的脾细胞以1∶10在50%的PEG1500作用下融合［8］。加HAT选择培养基重悬混匀后滴入到铺有饲养层细胞的3块96孔细胞培养板。放入37℃，含5%的CO2培养箱中培养。转染试剂盒-博特龙公司(图)由苏州博特龙免疫技术有限公司提供。苏州博特龙免疫技术有限公司在生物制品这一领域倾注了诸多的热忱和热情，博特龙一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场，衷心希望能与社会各界合作，共创成功，共创辉煌。相关业务欢迎垂询，联系人：刘总。)