细胞融合取已免0疫小鼠的脾0脏用不完全培养基制成细胞悬液，计数。收集选择生长状态良好的SP2/0骨0髓瘤细胞，制成细胞悬液，计数。将SP2/0骨0髓瘤细胞与免0疫小鼠的脾细胞以1∶10在50%的PEG1500作用下融合［8］。加HAT选择培养基重悬混匀后滴入到铺有饲养层细胞的3块96孔细胞培养板。放入37℃，含5%的CO2培养箱中培养。材料与方法一、材料AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。二、方法1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液，析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。第yi组：AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma，美国)混合，充分乳化后注入8～12周龄Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量抗原加不完全福氏佐剂(Sigma，美国)腹腔***，4周后用同量抗原加不完全福氏佐剂腹腔***，pei转染***，融合前3d作腹腔***加强免0疫。腹0水的纯化采集复水后，12000r/min离心15min，去掉沉淀等杂质。往离心后的腹0水中加入等体积的PBS，并添加***铵固体至50%饱和，静置2h，12000r/min离心15min，弃上清，用PBS重新溶解沉淀，然后再次加入***铵固体至45%饱和，静置两个小时左右，12000r/min离心15min弃去上清，用少量PBS溶解沉淀，即得到较纯的抗0体，对PBS透析除去***铵，透析时间为24h，透析过程中更换透析液两至三次。pei转染***-苏州博特龙公司(在线咨询)由苏州博特龙***技术有限公司提供。苏州博特龙***技术有限公司实力不俗，信誉可靠，在江苏苏州的生物制品等行业积累了大批忠诚的客户。博特龙带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！)