甲胎蛋白(AFP)是一种胎儿特异性糖蛋白，分子量约70，000～72，000道尔顿^，在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成，正常人血中含量甚微。1972年有人首0次报道开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的AFP。若胎儿羊水中AFI’值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿，亦见于其他多种畸形，如先0天性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺发育不全等。1983年发现母体血0清AFP水平的降低与唐氏***有密切关系一。因此制备高0效特异的AFP单克0隆抗0体(McAb)具有重要的意义。动物免0疫使用quickantibody作为免0疫佐剂，对小鼠腿部肌肉***免0疫，MRJ重组蛋白(1μg/mL)与免0疫佐剂各200μL混匀免0疫6-8周龄BALB/c小鼠4只，每只***100μL。初次免0疫后第21天同样的方法进行第二次免0疫，第35天尾静脉取少量血做效价检测，间接ELISA检测效价滴度高于1∶8000则进行冲击免0疫，冲击免0疫直接以不加佐剂的MRJ蛋白对小鼠冲击免0疫一次，每只20μg。冲击免0疫后96h内取脾0脏细胞做细胞融合。由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数，所以改良法抗原用量明显少于常规法，从而大大减少了实验成本的消耗。此外，本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率，发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。经过后续实验，B细胞，证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后，抗0体阳性率可达检测孔的90％以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养，并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力，并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。B细胞-苏州博特龙公司(在线咨询)由苏州博特龙***技术有限公司提供。苏州博特龙***技术有限公司为客户提供“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”等业务，公司拥有“博奥龙/BiodragonAbBox”等品牌，专注于生物制品等行业。，在江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：刘总。)