快速佐剂-苏州博特龙(图)
1.免0疫:本产品与抗原混合搅拌能很快形成油包水状态,在1:1-1:2情况下都能形成稳定的乳液,1:2乳化较1:1粘稠些,乳化后滴水数周不散;经多品种抗原多种属动物测试免0疫效果极0好,由于乳化彻0底牢固,因此跟其他佐剂相比比较不容易出现免0疫耐受现象。2.单抗腹0水制备:将佐剂***BALB/C小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天),然后***杂交瘤细胞,建议每只***80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天,但通常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍,且单抗腹0水效价不变。使用方法1.用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按每针次50μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg;(2)亚单位蛋白抗原每针次1-10μg;(3)免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg;(4)肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。2.37oC水浴中解冻佐剂,充分混匀,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1混匀。3.通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0***免0疫小鼠,快速佐剂,每只小鼠***100μl。4.第7天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次免0疫佐剂和抗原现配现用5.第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4+TH1和/或CD8+CTL反应。杂交瘤细胞的筛选与克0隆细胞融合后,培养于添加了HAT的选择培养基的96孔板中,培养一天后半定量换液,培养基更换时应注意轻缓,第5天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆,第7天左右,杂交瘤细胞能长至铺满孔底约1/10。此时进行ELISA检测养心细胞孔。取细胞培养上清对MRJ融合蛋白进行间接Elisa检测,筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔,有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆,经过3次亚克0隆后,获得了能够稳定分泌抗MRJ融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从96孔板-24孔板-10cm培养皿的顺序扩大培养,部分细胞用于腹0水制备单抗,部分细胞冻存备用。快速佐剂-苏州博特龙(图)由苏州博特龙***技术有限公司提供。苏州博特龙***技术有限公司是从事“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:刘总。)