哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。将外源DNA导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微注0射、电穿孔、脂质体介导的转染，以及***近出现的以高分子聚合物为载体的***传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体，通过病毒感0染的方式将外源DNA导入到细胞中，其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统***为常用。了解产品参数及价格，请百度搜索“博奥龙”，进入博奥龙官0网，搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、AlexaFluor、Cy3、Cy5、AMCA、TRITC、TexaRed等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。使用方法1.将新鲜消化的BHK-21细胞接种到24孔细胞板中，每孔1~2×105细胞，转染***，1ml完全培养基。备注：可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤2~5进行转染，无需18~24小时的等候时间。2.将2μg质粒DNA和3~5μl转染***分别稀释到50μl生理盐水中。备注：质粒DNA和转染***的***适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出1~2μg和3~5μl范围。3.合并上述两溶液并混匀。备注：无需其它转染***所需的10~30分钟的等候时间。4.将上述复合物直接加入到细胞培养基中，用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。5.将细胞板移至37oC/5%CO2孵箱中进行培养。备注：无需在转染后4~6小时补加血0清或更换培养基。6.24~72小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。注意事项：1.质粒DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒DNA。2.稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。3.培养基：经过DMEM、RPMI-1640和M199等常规培养基测试，推荐使用含5~10%牛血0清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。4.以24孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒DNA用量为2μg、转染***用量为3~5μl，请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告***进行优化。5.如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染，从而可节省18~24小时的转染前细胞培养时间。转染***-博特龙技术有限公司(图)由苏州博特龙免疫技术有限公司提供。苏州博特龙免疫技术有限公司在生物制品这一领域倾注了诸多的热忱和热情，博特龙一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场，衷心希望能与社会各界合作，共创成功，共创辉煌。相关业务欢迎垂询，联系人：刘总。)