重组蛋白新型佐剂-苏州博特龙公司(在线咨询)
使用方法1.用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按每针次50μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg;(2)亚单位蛋白抗原每针次1-10μg;(3)免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg;(4)肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。2.37oC水浴中解冻佐剂,充分混匀,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1混匀。3.通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0***免0疫小鼠,每只小鼠***100μl。4.第7天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次免0疫佐剂和抗原现配现用5.第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4+TH1和/或CD8+CTL反应。动物免0疫使用quickantibody作为免0疫佐剂,对小鼠腿部肌肉***免0疫,MRJ重组蛋白(1μg/mL)与免0疫佐剂各200μL混匀免0疫6-8周龄BALB/c小鼠4只,每只***100μL。初次免0疫后第21天同样的方法进行第二次免0疫,第35天尾静脉取少量血做效价检测,间接ELISA检测效价滴度高于1∶8000则进行冲击免0疫,冲击免0疫直接以不加佐剂的MRJ蛋白对小鼠冲击免0疫一次,每只20μg。冲击免0疫后96h内取脾0脏细胞做细胞融合。1.第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。2.第35天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。3.若抗0体滴度没有达到要求,可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注:通常情况下小鼠只需免0疫2针,重组蛋白新型佐剂,而家兔往往需要免0疫3针。4.若免0疫3针,可在第52-56天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。备注:佐剂免0疫效果有时也与抗原特性有关,若免0疫3针后仍达不到要求,不建议进行更多针次免0疫。重组蛋白新型佐剂-苏州博特龙公司(在线咨询)由苏州博特龙***技术有限公司提供。“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”选择苏州博特龙***技术有限公司,公司位于:江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810,多年来,博特龙坚持为客户提供好的服务,联系人:刘总。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。博特龙期待成为您的长期合作伙伴!)
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