弗氏不完全佐剂的成分-博特龙公司(图)
使用方法1.用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为小鼠每针次10-20μg、家兔每针次20-50μg。2.用振荡器充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl)与抗原按体积比1:1混合,并用振荡器剧烈振荡5-10min,直至静止放置10min水油相不分层。备注:与抗原混合前佐剂分层属正常现象,但必须充分混匀后才能取用。3.通过皮下或肌肉单点***免0疫动物,小鼠每针次100μl,家兔每针次200μl。(1)佐剂与抗原混合后应尽快***,若放置时间较长出现水油相分层,则必须按上述步骤2重新振荡混匀;(2)抽入针管前应摇匀,抽入针管后应尽快***;(3)尽量选择引流淋巴0结附近(如腋窝和腹0股0沟附近)的皮下或肌肉进行免0疫。QuickAntibody-Mouse5W(5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂)QuickAntibody-Mouse5W用途通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体,ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)可达到1:10000-1:10000000。QuickAntibody-Mouse5W使用方法(详见使用说明书)1.用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按每针次50μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较强的灭活全病毒或全***以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg;(2)免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;(3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。2.充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。杂交瘤细胞的筛选与克0隆细胞融合后,培养于添加了HAT的选择培养基的96孔板中,培养一天后半定量换液,培养基更换时应注意轻缓,第5天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆,弗氏不完全佐剂的成分,第7天左右,杂交瘤细胞能长至铺满孔底约1/10。此时进行ELISA检测养心细胞孔。取细胞培养上清对MRJ融合蛋白进行间接Elisa检测,筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔,有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆,经过3次亚克0隆后,获得了能够稳定分泌抗MRJ融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从96孔板-24孔板-10cm培养皿的顺序扩大培养,部分细胞用于腹0水制备单抗,部分细胞冻存备用。弗氏不完全佐剂的成分-博特龙公司(图)由苏州博特龙***技术有限公司提供。“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”选择苏州博特龙***技术有限公司,公司位于:江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810,多年来,博特龙坚持为客户提供好的服务,联系人:刘总。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。博特龙期待成为您的长期合作伙伴!)
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