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由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数,所以改良法抗原用量明显少于常规法,从而大大减少了实验成本的消耗。此外,无缝kelong(***盒),本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率,发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。经过后续实验,证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后,抗0体阳性率可达检测孔的90%以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养,并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力,并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。使用方法1.用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为小鼠每针次10-20μg、家兔每针次20-50μg。2.用振荡器充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl)与抗原按体积比1:1混合,并用振荡器剧烈振荡5-10min,直至静止放置10min水油相不分层。备注:与抗原混合前佐剂分层属正常现象,但必须充分混匀后才能取用。3.通过皮下或肌肉单点***免0疫动物,小鼠每针次100μl,家兔每针次200μl。(1)佐剂与抗原混合后应尽快***,若放置时间较长出现水油相分层,则必须按上述步骤2重新振荡混匀;(2)抽入针管前应摇匀,抽入针管后应尽快***;(3)尽量选择引流淋巴0结附近(如腋窝和腹0股0沟附近)的皮下或肌肉进行免0疫。QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆抗0体。常规多克0隆抗0体制备多使用兔子,不但免0疫针次多、抗原用量大和抗0体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托专门单位制备。使用QuickAntibody免0疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克0隆抗0体,标准免0疫程序只需要简单地免0疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体。(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克0隆抗0体,1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体足以满足绝大多数用户的实验需求,包括用于酶联免0疫、免0疫印迹、流式细胞、免0疫组化和免0疫沉淀等)。QuickAntibody建议常温运输,2~8oC保存,无菌取用,有效期18个月。无缝kelong(***盒)-苏州博特龙公司(在线咨询)由苏州博特龙***技术有限公司提供。苏州博特龙***技术有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工***,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。博特龙——您可信赖的朋友,公司地址:江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810,联系人:刘总。)
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