杂交瘤细胞的筛选与克0隆细胞融合后，培养于添加了HAT的选择培养基的96孔板中，培养一天后半定量换液，培养基更换时应注意轻缓，第5天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆，第7天左右，杂交瘤细胞能长至铺满孔底约1/10。此时进行ELISA检测养心细胞孔。取细胞培养上清对MRJ融合蛋白进行间接Elisa检测，筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔，有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆，经过3次亚克0隆后，获得了能够稳定分泌抗MRJ融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从96孔板-24孔板-10cm培养皿的顺序扩大培养，部分细胞用于腹0水制备单抗，部分细胞冻存备用。1．9腹0水效价的测定1mg/mL的MRJ原核表达白每孔100μL，包被Elisa酶标板过夜，脂质体转染***，以SP2/0细胞培养上清为阴性对照，用间接Elisa方法检测腹0水的效价。同时WesternBlot检测抗0体使用于WesternBlot的效价，用MRJ重组蛋白做抗原进行SDS-PAGE电泳，用制备的MRJ单克0隆抗0体作为一抗，设置抗0体稀释浓度分别为1∶500;1∶1000;1∶2000;1∶3000;1∶5000。进行WesternBlot检测。注意事项1.本产品设计用于小鼠免0疫，但理论上也可用于部分其他实验动物。客户若要用于其他实验动物，请通过预实验自行确定是否可用以及佐剂用量。2.本产品是一种强0效细胞免0疫佐剂，若免0疫后检测不到特异性细胞免0疫应答，请客户***关注抗原质量和检测方法。3.本产品仅供动物实验使用，不得用于***免0疫。货号：KX0210044规格：1ml备注：建议常温运输，-20oC保存，无菌取用，有效期18个月。脂质体转染***-博特龙(推荐商家)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是从事“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：刘总。)