1．9腹0水效价的测定1mg/mL的MRJ原核表达白每孔100μL，包被Elisa酶标板过夜，以SP2/0细胞培养上清为阴性对照，用间接Elisa方法检测腹0水的效价。同时WesternBlot检测抗0体使用于WesternBlot的效价，用MRJ重组蛋白做抗原进行SDS-PAGE电泳，用制备的MRJ单克0隆抗0体作为一抗，设置抗0体稀释浓度分别为1∶500;1∶1000;1∶2000;1∶3000;1∶5000。进行WesternBlot检测。结果一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较对两组试验动物在完成了基础免0疫后，尾静脉采集少量血液，分离血0清，铝佐剂，进行间接ELISA测定抗0体效价，检测结果见图1。由图中数据可知，新的改良免0疫方法，在第二次免0疫后，抗0体效价即达到1：104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows13．0版)进行t检验，统计结果差异极显著(P(0．001)。二、两种免0疫方式小鼠融合率比较在细胞融合后约7～10d可见孔内杂交瘤细胞生长，当细胞融合成片达孔底面积的35％～50％时，用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短，但获得的抗0体效价更高。动物免0疫使用quickantibody作为免0疫佐剂，对小鼠腿部肌肉免0疫，MRJ重组蛋白(1μg/mL)与免0疫佐剂各200μL混匀免0疫6-8周龄BALB/c小鼠4只，每只100μL。初次免0疫后第21天同样的方法进行第二次免0疫，第35天尾静脉取少量血做效价检测，间接ELISA检测效价滴度高于1∶8000则进行冲击免0疫，冲击免0疫直接以不加佐剂的MRJ蛋白对小鼠冲击免0疫一次，每只20μg。冲击免0疫后96h内取脾0脏细胞做细胞融合。铝佐剂-苏州博特龙公司由苏州博特龙技术有限公司提供。铝佐剂-苏州博特龙公司是苏州博特龙技术有限公司今年新升级推出的，以上图片仅供参考，请您拨打本页面或图片上的联系电话，索取联系人：刘总。)