siRNA转染***-苏州博特龙公司
已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起***表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992Sep22;31(37):9025-30);如***ATP酶的活性(BiochimBiophysActa.2008Apr;1777(4):362-8);如与线粒体膜发生作用(JBiolChem.1989Jan25;264(3):1508-15);转染siRNA造成脱靶效应等等。细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小,脂质体这些作用是造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。这已引起了许多研究者的注意。磷酸钙在良好的转染条件下,可以在293T等细胞的转染达到较高的转染效率。但磷酸钙转染有一个突出的问题,非常不稳定,siRNA转染***,尤其受PH值的影响非常大,在实验中使用的每种***都必须小心校准,保证质量,因为甚至偏离***优条件十分之一个PH都可能导致磷酸钙转染的失败,经常即使***熟练的转染实验者也不能保证每次磷酸钙转染的成功,他们可能经常为莫名其妙的转染失败而沮丧。同时,他们还经常发现,往往小体积的转染比如6孔板以下的转染效果比较理想,可一换到大皿,经常转染效率下降很快。磷酸钙的先天缺陷往往是实验梗阻的主要原因。了解产品参数及价格,请百度搜索“博奥龙”,进入博奥龙官0网,搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、AlexaFluor、Cy3、Cy5、AMCA、TRITC、TexaRed等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。注意事项:1.质粒DNA:请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒DNA。2.稀释液:0.85%(W/V)生理盐水,用低内毒0素纯水配制,高压消毒或除0菌过滤。3.培养基:经过DMEM、RPMI-1640和M199等常规培养基测试,推荐使用含5~10%牛血0清的DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。4.以24孔细胞板转染实验为例,推荐每孔低内毒0素质粒DNA用量为2μg、转染***用量为3~5μl,请在正式实验前根据不同培养基用报告***进行优化。5.立传立转要求使用生长旺盛的细胞,即细胞生长至80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞,将明显影响立传立转的效率。6.立传立转对细胞状态要求较高,如果转染效果不理想,可按QuickShuttle-Enhanced的转染方法(见本说明书第4页),在细胞贴壁后进行标准转染操作。siRNA转染***-苏州博特龙公司由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是江苏苏州,生物制品的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在博特龙***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创博特龙更加美好的未来。)