生物素-酪胺信号放大***盒（HRP底物）酪胺信号放大技术（TSA，Tyramidesignalamplification）主要原理是，在过氧0化氢存在情况下，标记在抗0体上的HRP将底物酪胺活化，后者与相邻的蛋白上的酪氨酸残基生成稳定的共价结合，因此这些蛋白（如HRP、抗0体）上会富集大量带有生物素标记的酪胺，使信号被有效放大。生物素为小分子化合物，分子量244。亲和素与生物素有极高的亲和力，结合牢固，而且特异性高，每个亲和素可结合4个生物素。用小分子生物素与HRP酶标记的亲和素发生特异性反应，可减小抗原抗0体反应的空间位阻，使反应明显放大。1.检测细胞或***中是否含有内源性过氧化物酶的方法：将***切片水化后，加入底物DAB，如果变为棕色，说明***切片含有过氧化物酶，需要封闭内源性过氧化物酶活性。2.检测细胞或***中是否含有内源性碱性磷酸酶的方法：将***切片水化后，加入底物BCIP/NBT，如果变为棕色，说明***切片含有内源性碱性酶，需要封闭其活性。3.影响过氧化物酶的分子有血红素蛋白如红细胞中的血红蛋白，肌肉细胞中的肌红蛋白，粒细胞和单核细胞中的细胞色素及肝0脏和shen脏之中的触媒。加生物素化抗0体1.去掉缓冲液，擦掉切片周围的液体。2.加生物素化抗0体，杂交瘤融合筛选，完全覆盖切片。3.室温孵育30min。4.用洗涤液洗去抗0体，用洗涤液润洗5min。加亲合素-HRP1.去掉缓冲液，擦掉切片周围的液体。2.加亲合素-HRP，完全覆盖切片。3.室温孵育30min。4.用洗涤缓冲液洗去亲合素-HRP，用洗涤缓冲液润洗5min。显色1.加显色液（自备）显色。可能出现的问题和解决方法杂交瘤融合筛选-博特龙(图)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司位于江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前博特龙在生物制品中享有良好的声誉。博特龙取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。博特龙全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)