抗原制备及纯化抗原制备:参照文献［10］制备MRJ抗原。复苏pET28a-mrj转Rosetta菌0种接种于具Kana抗性的10mL液体培养基中的，37℃培养过夜，次日以1∶50转瓶进行扩大培养，当菌液OD600达0．6时加入浓度为5mmol/L的IPTG，37℃诱导8h超声碎裂后进行考马斯亮蓝染色检验，有目的蛋白的大量表达。抗原大量制备及纯化:以5×10-4mol/L浓度的IPTG，37℃条件下大量诱导(200mL菌液)8h后收集样品，超声裂解后将所得MRJ蛋白过Ni-IDA凝胶柱亲和纯化，考马斯亮蓝染色后检测目的蛋白纯度高于90%，可用于单克0隆抗0体制备动物免0疫的抗原。使用方法1.用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度（按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl用量配制）。备注：推荐使用的抗原用量为小鼠每针次10-20μg、家兔每针次20-50μg。2.用振荡器充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl）与抗原按体积比1:1混合，并用振荡器剧烈振荡5-10min，直至静止放置10min水油相不分层。备注：与抗原混合前佐剂分层属正常现象，但必须充分混匀后才能取用。3.通过皮下或肌肉单点免0疫动物，小鼠每针次100μl，家兔每针次200μl。（1）佐剂与抗原混合后应尽快，若放置时间较长出现水油相分层，则必须按上述步骤2重新振荡混匀；（2）抽入针管前应摇匀，抽入针管后应尽快；（3）尽量选择引流淋巴0结附近（如腋窝和腹0股0沟附近）的皮下或肌肉进行免0疫。分类1.生物性佐剂是***或其产物，其本身具有免0疫原性，如分枝杆0菌（结0核杆0菌、卡介苗）、短小棒状杆0菌、百0日咳杆0菌、革兰阴性杆0菌内毒0素等。此外发现粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-l、白细胞介素-2、干扰素-γ等的佐剂活性。2.无机佐剂如氢氧化铝、明矾、磷酸铝等。3.人工合成佐剂双链多聚肌苷酸、胞苷酸、双链多聚腺苷酸。4.油剂花生油乳化佐剂、矿物油、植物油、羊毛脂等。5.弗氏佐剂弗氏佐剂又分弗氏不完全佐剂和完全弗氏佐剂，铝佐剂，是目前动物实验中***常见的佐剂，但易在局部形成肉芽肿和持久性***，因此不适用于***使用。近年来，人工合成胞壁酰二肽作为卡介苗细胞壁中的一种成分，用于提高疫0苗的接种效果，是对***无不良反应的有效佐剂。铝佐剂-苏州博特龙(图)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司位于江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前博特龙在生物制品中享有良好的声誉。博特龙取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。博特龙全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)